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最近遇到一個問題,想請教大家: 我表現一個24kDa的protein於Ecoli(BL21DE3) ,跑PAGE與control比較後,的確可以在約24kDa的位置, 看到明顯的band被誘導出來,但是, 進行His純化後,結果原本受IPTG誘導的重組protein 已經不在24kDa的位置了,跑到37kDa 但是,我用抗體又能hybid到37kDa的band, 我懷疑會不會我的protein被磷酸化了,有方法可以讓我的protein回復成 24kDa嗎?或者有方法證明我的重組蛋白在37kDa是因為被磷酸化所造成的嗎? 感激不盡~~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.70.89
ssuny:磷酸化分子量應該不會差到那麼大..醣化? 05/25 23:08
ssuny:不然試試看去磷酸化處理..看會不會恢復囉 05/25 23:09
wensing:dimer? 有加dtt or β-ME? 05/26 00:47