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最近老師叫我拿insert gene 的plasmid去定序 看gene有沒有mutation 但都只定到一小部份,大部份都是N,而且後半段訊號會不見 plasmid跑gel 出來的size是對的 PCR完後做純化,用酒精沉澱,最後在室溫下倒著晾乾PCR產物殘留的酒精, 要等2天左右才能上機 是不是等的時間過長導致訊號不見,還是PCR出問題 我有一次在P完後,做純化,立刻上機,就做得出來 但因為一些因素,非得等2天才能上機 有那位大大能幫我解決這個問題>.< -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.22.18.90
Portland:避光? 06/01 08:38
xenopus:insert size多大?你用幾個primer去定序? 06/01 09:28
xenopus:當然你有確定insert在裡面嗎?有沒有digest看看? 06/01 09:29
pshamrock:primer對嗎? 06/01 18:20
mike0916:抽多點plasmid....直接拿plasmid定序試試看.... 06/02 01:27