[問題] 關於HepG2 cells transfection效率的問題

[amykuo0711 (默契十足)]

想請教版上的同學 是否有人有用HepG2做transfection的經驗
目前我是利用HepG2做reporetr assay，但是同樣的protocol帶我的學姊作的出來
我試了4次 plasmid送進去的效率卻很差 luciferase activity根本無法assay
我懷疑是我 HePG2maintain 的過程有問題 因為之前用學姐的細胞 就可以順利做出來
但是細胞到了我手上 subcultureㄧ次後 又發生一樣的問題 是因為HePG2不能長到DISH
八分滿才做實驗嗎? 還是他有什麼特性是我不了解的? 好幾個禮拜實驗都做不出來很苦惱
 希望能盡快解決問題.....


想請教同學是否有這樣的經驗 可提供我改進的方向? 謝謝

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推 Kunzite:你用什麼reagent做transfection？
推 amykuo0711:我是用QIAGEN Effectene 這組kit
推 aggaci:我用MIRUS TL1還不賴