[問題] 關於RT-PCR 電泳圖的問題?

[gwendiline (丹丹)]

附圖：
http://www.wretch.cc/album/album.php?id=gwendiline&book=28

跑完RT後 電泳圖會呈現類似"陰陽海"的樣子
上面白 下面黑
特別是 沒有load sample的ware
也會出現這樣的情形

不知道有沒有人有經驗
知道這是怎麼一回事

先說一下
電泳槽都是正常
而且出現的情形是時好時壞..
有時有 有時沒有~
buffer 也有換
EtBr 和agar也都搖得均勻


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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 140.120.192.30
推 transmore:EtBr本來就會往負極的地方移動
推 gwendiline:不過...為何其他的膠片不會這樣?@@ 跑出來都很漂亮..
推 hinsky:是用real-time 跑RT嗎?
推 transmore:EtBr是加固定量嗎?我們是隨意加..加的多就比較明顯
推 gwendiline:不是real time喔 是一般PCR 另外EtBr濃度固定0.5μg/ml
推 wangba:EtBr加太多  試著原濃度的1/10
推 shellyaurora:請問你是外染還內染？ 印象中好像外染比較會這樣耶
推 gwendiline:我是內染唷~直接加進稍冷的agar 均勻"有技巧"地mix
推 hychou:同意一樓的說法，而且內染比較會這樣，外染不會。