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※ 引述《hsejotim (小石頭)》之銘言: : ------------------------------------------------------------------------------ : T4 DNA polymerase可以讓Sticky end平滑化(blunting) : (有兩個不同的sticky end想要用blunting方式) : 之後想ligation起來(T4 DNA ligase) : 可是並沒有成功 : 想請問各位大大有誰用過的經驗或撇步 : 提供給我參考看看吧 : 謝謝^^ 提供你一個方向 但我不曉得會不會成功 在molecular cloning裡 先70度加熱5~10min,使single strand(突出的一股)的部份不會自己黏起來 然後放冰上一下 之後再加入dNTP和T4 DNA polymerase,在37度裡培養15分鐘 你可以試試看... 可是我覺得,如果可以的話,把它們都弄成有同樣的restriction enzyme切點 sticky end應該比較好接吧..... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.14.184.57