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最近在補data,但是跑RT-PCR做出cDNA,再用PCR放大後,internal control怎麼跑都 跑不齊,我跑的internal control是GAPDH,請問除了RNA在定量沒定好之外,還有沒有 別的原因會跑不齊? 因為之前跑都沒問題,所以我在想是不是有東西(試劑)壞掉? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.128.68.248
mikis1107:請問什麼是跑不齊??? 06/12 14:33
freesoul:跑不齊是指size不一樣還是強度不一樣? 06/12 15:00
liaschou:強度不一樣 06/12 16:54
liaschou:不好意思,我的語文能力不太好。 06/12 16:56
fungihsu:你有做master mix嗎? 會不會是試劑加的量有差異 06/12 17:27
liaschou:Master mix 是什麼阿?? 06/13 00:02
liaschou:是指先把試劑混和在同一管嗎? 我們有這樣做。 06/13 00:03
liaschou:定量用不同的分光光度計都做出一致的數據 06/13 00:04
liaschou:都到最後關頭,才出問題,唉!! 06/13 00:06
b46006:pcr cycle數多一點可能band強度就會一樣了 06/13 16:38
liaschou:但是我已經跑28 cycle,在更高就失去它的準確性了吧? 06/14 12:16