[問題] 請問WB marker顏色會退掉嗎?

[mikis1107 (mikis1107)]

最近一次的WB發現
在transfer後marker顏色很深(應該表示都有trans過去)
但是在上完一抗wash三次以後發現
marker的顏色淡掉很多@@
而壓片也壓不出來
實驗室學長沒碰過
但我碰到了@@

有人有碰過降的情形嗎?

先說一下我的condition:

用semi-dry transfer 200 mA, 80 min
(含20% MeOH 的semi-dry transfer buffer)
blocking 5% 脫脂奶粉 60 min
wash 10 min/time, 3 times
一抗1:1000 O/N


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◆ From: 163.29.223.38
推 stemcell:PBST or TBST 配錯？  detergent濃度太高？
推 mikis1107:TBST應該是沒錯因為其他學長姊沒問題..detergent濃度也
→ mikis1107:是學長姐所提供的用量@@
推 leoblack:我們marker都會人工手動畫上去耶~
推 beowulfo:用鉛筆稍微點一下..
推 stemcell:如果是prestained marker應該也不太會掉吧...
推 mikis1107:我也是會畫上去~只是我發現原本很深的顏色卻漸漸淡去