推 kyokolove:我沒有拿去跑電泳耶... 我是設計P 200bp以內的 07/10 00:03
→ kyokolove:請問template量最高可增加到多少阿 我目前是40ng 07/10 00:04
推 aggaci:跑電泳看看 07/10 00:22
※ 引述《kyokolove (心想事成)》之銘言：
: 我最近做real time PCR
: 當初這個基因我已經用RT-PCR 做過了
: 想說用real time能更準確比較
: 結果 我卻跑不出結果 每次都是undetect
: 我一共用了兩種primer 一種是用primer3設計
: 一種是RTprimerDB這個網站提供的
: 可是兩個網站都呈現出一樣的結果--> undetect
: 而且他們的曲線長的很奇怪
: 都是在threshold以下 一直呈現鋸齒狀而有向上的趨勢
: 可是一直到40個cycle前都沒有衝過threshold
: 可是我的internal control GAPDH跑的很正常
: 所以排除機器或是材料的問題...
: 再說正常的曲線應該是會突然有暴衝幾乎直線通過threshold的感覺巴
: 請問有人有這種經驗嗎 這樣的 曲線 undetect 代表什麼情況呢???
: 請大家幫幫我~~~~~~~ 我已經重做快兩個月了 Q ____ Q
: 謝謝大家~~
是否有把QPCR玩的產物拿去跑電泳？
你的產物預期多大？
這很明顯應該是沒擴增出來...
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