推 K587262:看膠片比較準吧 如果是smear 時間點往前挪 08/09 19:10
→ K587262:還有就是 我會收細胞上清液 08/09 19:11
推 Koilocytosis:謝謝! 我有收上清液, 膠片的話可能要晚點才能上傳:) 08/09 19:37
推 skenzo:請問是何種細胞株呢 08/10 09:55
推 Koilocytosis:口腔癌細胞株 OECM-1 08/10 19:35
實驗方法
3x10^6個細胞以200uM, 500uM, 1mM H2O2處理六小時
(paper上說可誘發凋亡, 也可見到DNA ladder)
用TRI reagent抽DNA (方法:http://www.mrcgene.com/tri.htm).
最後加入20uL水將DNA回溶,
但因前一步驟的酒精沒有揮發的很完全, 所以總溶液體積約為40-60uL
取一半(30uL)樣品, 加上dye混合之後就跑1.2%瓊脂電泳
實驗結果
之前用這方法抽DNA所測出OD約為1.4-1.7
在1200bp上方(也就是分子量>1200bp)有兩條band, 下方則是很淡smear的樣子.
我的問題
我想請問版上是否有高手用過TRI reagent抽DNA, 並觀察其DNA ladder情形呢?
我不曉得是DNA沒抽成功呢? 還是每個well放的量太少, 所以看不到ladder的樣子呢
麻煩請版上高手為我解惑呀!! 感激不盡! ^^*
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