我不太懂你clone promoter的方法
可以給我一個link看妳的protocol嗎
from my understanding,
you should not see bands in the first PCR with genome walking...
but maybe my protocol is different from yours
※ 引述《kpp (...)》之銘言：
: 目前採用genome walking方法，來選殖基因的promoter
: 實驗拖延了半年以上 還是沒結果
: (曾經出現第一次PCR有條帶，但做nested PCR反而smear >"<)
: 已經分別設計2組引子對去實驗 PCR結果依然smear
: 我設計preimer的Tm值大概都是64~65度左右
: (protocol是寫建議67度以上，但我找不到合適的區域)
: Taq用過Kit的 也曾試過Ex-taq 跟LA-taq 但成效都不佳 (需配合buffer嗎??)
: 救命阿 現在不管怎麼跑PCR 都沒出現條帶了 ~"~
: 請問可能是哪裡出錯? 或是該怎麼改進
: 另問大家 PCR升降溫設定條件為何? 謝"
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