作者mikis1107 (mikis1107)
看板Biotech
標題Re: [問題] 大分子的western blot壓不出來
時間Tue Aug 21 17:18:04 2007
※ 引述《boblu.bbs@beta.life.nthu.edu.tw (六百)》之銘言:
: ※ 引述《sktzy.bbs@ptt.cc (sad)》之銘言:
: > 我要看的蛋白質約280kDa大小
: > 用12%的PAGE跑(因為為了妥協其他的sample)
: > 不過72kDa以上的部分 在transfer的時候轉的不完全
: > 有什麼方法可以增加大分子transfer的效率呢?
: > PS. 已經提高protein量了 不過band還是時有時無 不然就是太弱
: > 所以才想說如果有方法可以提高trnasfer的效果 說不定可以解決
: > 感謝阿~~~~~~~~~~~~~~~
: 你知道 transfer buffer 的配方視目標蛋白質的分子量不同而有不同吧?
: Western 技術的專書上應該有
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借題問一下
如果我想跑350 kd的分子
是不是可以配6%得SDS-PAGE來跑呢?
可是又怕太軟的話有沒有解決方法?
Western技術專書有推荐的嗎?THX^^
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◆ From: 163.29.223.6
推 senlin:Weber and Osborn (1969) J. Biol. Chem. 244, 4406-12. 08/21 18:59
推 mikis1107:請問有沒有新一點的版本呢?THX^^ 08/22 00:15
推 sktzy:如果確定只有一條band 不需要分開 也可以跑%高一點的吧! 08/22 01:01