推 mkj:謝謝 我會試試看~ 08/27 21:44
※ 引述《mkj (shadow )》之銘言:
: 請問
: 血液加上平衡溶液後 加進ficoll-paque裡面
這個步驟要小心一點!
我會用滴管"慢慢地"沿著離心管壁滴入,使之緩慢地累積在ficoll上,
也就是說, 血液+PBS的混合液與ficoll有明顯的界面!
: 離心之後會有上清液 白血球 ficoll等幾層
: (但我的白血球那層 總是不明顯)
我曾經用過壞掉的Ficoll (是長了霉菌的ficoll..)
離心後分層會不太明顯,當時換一瓶新的就解決了
: 吸取上清液之後
: 再來要吸白血球那層
: 但總是好像吸不到 又好像吸不完
: 可是都吸到ficoll那層去了
吸取buffy coat混到一些ficoll不會怎樣,之後再以PBS wash幾次就可以去除
: 白血球那層感覺還是在
: 結果離心之後
: 底下不只有白血球 還有紅紅的 (紅血球?)
吸取的時候,吸取力量可能要再放輕點;我會認為,那是不小心連最底層的
紅血球也吸上來的緣故
: 不知道我該怎麼改進呢
: 我只要白血球就好了
: 謝謝
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