[問題] western blotting

[shiouchou ()]

想請問一下

我最近western blot 的時候

常常會出現membrane 在加完ECL 後

整片發螢光的現象

導致之後壓片結果是片子ㄧ片黑  (形狀就是membrane 的形狀)

可是我之前依照相同的實驗條件跟藥品

實驗都不會這樣  (例如:前ㄧ天做都正常  隔ㄧ天就整片黑)

想請問是什麼原因可能會照成這樣的結果

謝謝大家


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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 140.109.90.199
推 bigricebug:有可能是二抗wash不乾淨或底片本身曝光過.參考看看囉^^
推 kaifish:在暗房中就看到整片發螢光的現象，有可能是Wash的問題喔~
推 newivan:有可能沒block好,1抗.2抗皆粘到membrane上,so............
推 realism:應該是blocking的問題 你的blocking是? milk? reused BSA?
推 dorphilvet:2抗濃度太高、blocking濃度不夠，wash不乾淨^^