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請問 如果萃取細菌genomic DNA 能不能用Alkaline lysis 方法 在加入MX3 buffer離心後 留下沉澱物(genomic DNA,protein,少量plasmid DNA) 去掉上清液(大都plasmid DNA) 然後再用PCI或CI等等去掉protein 留下的DNA 就是要萃取的genomic DNA 這樣的方法可行嗎? 或是有其他可以把genomic DNA跟plasmid DNA兩者分開的方法? 學校實驗課 儀器不多不高級 能做出純度高的當然更好 謝謝各位!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 59.113.187.217
Crow22312:烏鴉是沒用過(也沒聽說過)您說的方法抽 genomic DNA ... 10/16 02:55
Crow22312:不過烏鴉知道一些線上的傳統方法或許會符合您的需求... 10/16 02:58
Crow22312:參考 http://0rz.tw/d43ae 第四個的方法感覺還頗容易 10/16 02:59
Crow22312:就加減參考吧... 因為MX3的鹽類(HOAc/KOAc?)下去以後... 10/16 03:00
Crow22312:應該就不容易把 genomic DNA 完整的取回來了, 它們 10/16 03:01
Crow22312:很容易斷裂... 10/16 03:02
Crow22312:非常純的 genomic DNA 純化除了用 kit 那套 spin-column 10/16 03:27
Crow22312:方法外烏鴉就不清楚了, 還望知道的高人補充 ._./ 10/16 03:28
elin116:這種方式我用過 (如果你指的M3 是所謂的 HOAc/KOAc 的話) 10/16 18:18
elin116:另外有些人把你那種作法 適用在較大的plasmid 也有人用 10/16 18:20
elin116:NH4OAc 10/16 18:22
elin116:抱歉喔 沒有看到 Genomic DNA 哈哈 拍謝啦 10/16 18:33