[求救] semi-dry transfer後protein糊掉(western)

[tinapig (提那豬)]

我所在的實驗室是用semi-dry的系統transfer protein

membrane是PVDF

有時候transfer完會發現protein糊掉

就是membrane上某一區域的marker糊掉

繼續做western的結果,想要看的band也是糊掉(或者甚至消失了)

想請教有沒有人有遇過類似的困擾,

或知道如何避免的？

或是覺得任何有可能的發生原因

可以給我指點指點～～～

感激不盡～～

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 140.112.125.81
推 echo:氣泡?
推 saviora:過熱?
推 paua:不要加太多methanol (<20%)?
推 bluecsky:氣泡應該是會transfer不完全..糊掉我想應該是過熱
→ bluecsky:BUFFER都先冰等要跑再拿出來..然後把電泳槽埋在冰裡跑
→ bluecsky:或是把電泳槽拿去冰箱跑也可以..在不然
→ bluecsky:就用低電壓跑久一點..我看過有人是放冷房用10V跑隔夜的
推 juyi7:有耶~我看我學姐有幾次也是這樣~不過我想跟樓上講的一樣吧