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我有用nanodrop先去測過RNA的濃度 有些有得到250ng/ul濃度的RNA 可是當我坐完RT-PCR後,居然啥都沒出現!!!而且還是GAPDH (博後的RNA借我當control, 她的就有出現,所已排除是技術或是reagents問題) 我用KIT萃取我的RNA,elute下來後也保存在 RNA-free tube 中 我想請問既然nanodrop可以得到RNA濃度,位啥我卻得不到PCR產物?? ps check過primer,序列是對的 謝謝大家了 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 86.144.163.223
knownany:印象中機器是測得到吸光值,但卻無法分辨RNA是否斷裂 11/13 12:15
yuchipeter:最好當天就做RT-PCR 然後你可以借一下別人的cDNA當 11/13 12:33
yuchipeter:positive control 表示reagent沒問題 11/13 12:33
sisyphus:測的是核酸的濃度..我們希望核酸手牽手.她們不一定給面子 11/13 20:15
jjlee:260 的吸光值該不會是 solvent 中的有機物的傑作吧.. 沒RNA 11/13 21:45
Ice9:下回選個字好唄?看你的文章有點吃力。 11/14 16:54
Ice9:博後的有,你的沒有----為什麼憑這個就能排除不是技術問題? 11/14 16:55
Ice9:對了,你放在"RNA-free tube"中,當然不會有RNA囉....XD 11/14 16:56
Ice9:您要不要再詳述一下整個過程,您提供的資訊不太夠。 11/14 16:58