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※ 引述《thewholeshit.bbs@ptt.cc (e04)》之銘言: > 如題 > 因為抽出來的DNA不純 > 用OD值去測的結果非常不理想 > 跑膠後因為有smear的情形 > 所以也無法直接和marker比較 > 聽說image j這個軟體可以做這個分析 > 但是下載之後我卻不會用 > 做到三條lane plot之後就卡住了 > 有沒有人可以告訴我詳細的分析方法 > (e.g 按a鍵--按b鍵...) > 謝謝 個人主觀上認為 smear 太嚴重神也救不了你 另外用影像定量在準確性上本有一定的限制 個人的做法是 先要跑一張用各種已知濃度的 DNA 跑的 gel 照下來轉灰階(通常 8bit, 256 階就夠了) 放 imageJ 裡面作 calibrate(calibrate 詳細做法請查線上說明) 然後開你要測量的檔案 先 subtract background (同樣,詳細做法查線上,不過我擔心 smear 很嚴重的時候 background 會去不掉) 然後框起你要測的 gel 上面你認為可能是 signal 的部分 measure 他的 integrated density(記得在 set measurements 裡面勾選先) 如果你 calibrate 有作對的話 會出現一個新視窗裡面就有測出的量了 --- 需要的話可以回信跟我約時間 MSN 線上指導 費用是每一小時美金十五元,請捐給聯合勸募 -- PTT 的推文站外看不到 本文來自生科站(telnet://140.114.98.20) 故 勿推此文 -- ※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw> ◆ From: 192.5.109.49