※ 引述《allergy1115 (白天彼此明爭暗鬥)》之銘言:
: 我有用nanodrop先去測過RNA的濃度
: 有些有得到250ng/ul濃度的RNA
: 可是當我坐完RT-PCR後,居然啥都沒出現!!!而且還是GAPDH
: (博後的RNA借我當control, 她的就有出現,所已排除是技術或是reagents問題)
: 我用KIT萃取我的RNA,elute下來後也保存在 RNA-free tube 中
: 我想請問既然nanodrop可以得到RNA濃度,位啥我卻得不到PCR產物??
: ps check過primer,序列是對的
: 謝謝大家了
抽完RNA後
可以先跑膠跑看看
260吸光質高也許是DNA污染之類的
跑完膠看看是不是很純的DNA
還有RT的溫度跟時間有沒有正確
PCR的三個溫度及時間條件有沒有確定
(可以帶個positive control)
祝你早日P出來喔^^
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 61.62.45.240