Re: 菌液養太久(菌死光)plasmid會不會不見？

[buterscotch (##)]

因為Amp在室溫之下太久是會失去功能的
所以養菌養太久的時候
37C 的高溫就會把Amp給弄壞掉

那就沒辦法提供有利的條件讓有plasmid的那些菌生長
既然沒什麼好處的話
那plasmid的製造就會變沒啦
（plasmid上面有Amp resistance的基因）

大致上我想應該就是這樣吧
說得不是很清楚


還有一個可能就是你的菌死了
如果要永久保存的話
請加Glycerol (大約一比一） 然後冰到 -80 C
要用的時候抽個 5 lambda 出來就可以養 成 10 ml 左右的 culture 了
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◆ From: 124.185.130.232
※ 編輯: buterscotch     來自: 124.185.130.232      (12/06 01:06)
→ njp13:我瞭解您的意思，但是已經產生具有plasmid的菌是不是會在死
→ njp13:亡後，plasmid也會被分解呢？ 所以之前產生的也抽不到
推 HCCY:我印象中保存plasmid的菌株 有把一些DNAse基因KO
→ HCCY:所以你說養太久抽不到 其實我覺得不太可能
推 bioeric:就抗生素熱掛了,菌不再需要plasimd保命,於是就被踢出菌外
推 HCCY:但我還是不認為養48小時就會完全抽不到
→ HCCY:你說的事情會發生 但是要到完全抽不到 至少要轉養到不含amp
→ HCCY:的LB 2-3代以上 才會大部分的菌都沒有plasmid
推 HCCY:^^第
推 tankcase:請問 若將小量菌貯存在4度C,貯存多久算老化?
推 buterscotch:存在 4C 一星期左右應該都沒問題。然後在沒 Amp 的 LB
→ buterscotch:的菌會沒有plasmid是我親身的體驗。 :P
推 HCCY:我也曾經忘記加Amp養菌 但是還是有抽到plasmid
推 njp13:結果我送新鮮的菌液給他們  就定出來了..可見真的是amp熱掛
→ njp13:造成雜菌叢生 使原本目標菌種被抑制掉，或者是plasmid被吐出
→ njp13:菌體  接著被分解了