推 umbrally:謝謝~~ 12/07 16:31
※ 引述《umbrally (成長)》之銘言：
: 我有一個clone 是接在puc18上
: 所以要抽取此plasmid 就要大量的養菌
: 但是養菌只能一管一管的養
: 也就是說 如果我要很大量的此clone
: 我就要養很多管的菌
: 請問有什麼方法可以更快速且更大量的使菌生長抽plasmid
: 我有想過把養菌的LBA量加倍
: 但是長出來的菌沒有變多
: 是因為時間不夠久嗎??(overnight)
: 還是因為細菌生長曲線的限制呢???
: 謝謝!!!!!!!!!!!!
先養小管菌 抽一小部份確認無誤後先放4度C...
拿錐形瓶配250mL的LB (塞上海棉拿去autoclave) 降溫後加入antibiotic
再加入小管養的菌1mL...37度C 16Hr
再來就去跟廠商買抽Maxi的kit..至於哪家廠商好 目前用過QIAGENE,Genemark
感覺GeneMark抽出來的量比較高(不過這看人XD) 大概1000-4000 ng/uL (總體積1000uL)
說大概是因為用過的人抽出來的量都不一樣XD 有人可以到4000 有的像我只有1千出頭= =
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