[求救] 請提供我做real time減少誤差的撇步!!

[kyokolove (心想事成)]

我最近作real time PCR阿

二重覆時總是有一些error bar很大

這樣真的很可惜阿~~~

想請問大家做real time時有沒有小撇步

可以減少兩管之間的誤差

好比說 tip怎樣阿 或是要先膜拜一下之類的XDD

任何都可以阿~~~ ^^

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 163.25.118.154
推 qqo8855436:機器??
→ oxoox:你的pepitman有先校正過嗎? 或是你自己的手勁也要校正
推 tietz:你要不要先簡單說一下你是測什麼?
→ tietz:gene expression還是病毒定量...之類
→ tietz:是SYBR還是Taqman system?
→ kyokolove:我是gene expression SYBR green~~
→ kyokolove:有時都很小心的做 但二重複有些會差到2個Ct耶....
推 tietz:SYBR的specificity比較差，我是用taqman所以才做二重複
→ tietz:有試過三重複嗎? 這樣有助於挑掉差異過大的數據
→ tietz:我也發現有些基因做起來，再現性真的比較差