※ 引述《seal0413 (seal)》之銘言：
: pCRII-TOPO聽說是最好接也較貴的cloning系統
: 我的pcr product 大約 140bp左右
: 我挑藍白有挑到
: 抽plasmid 也有比vector高一點(我跑膠跑0.8%且第一條DYE跳海後又多跑一下)
: 只是去切enzyme ECO1(VECTOR上的)
: 就怎樣也切不出 140bp左右的位置
: 請各位有用過TOPO的大大幫忙
: 感謝不盡^^
這個TA kit我有用過
我都是直接拿M13 forward primer + insert forward primer跟
M13 reverse primer + insert forward primer(因為有正接跟反接)
直接做PCR screening
然後就把positive的抓去送定序了
至於跑gel的話..沒記錯的話
TOPO約5.7k..你才多140bp..要明顯的分出來好像有點難
然後如果你真的想要明顯看到有140bp的話
建議把gel濃度提高到3%以上(我會跑6%的拉XD)..這樣100多bp的都可以很明顯的看到
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