之前有問過 TOPO 的問題，
現在又有了，想問問看有沒有人知道。
就是阿... 我把 pcr 接到 Topo vecter 上之後，
transform 到 E. coli 裡。
但是呢... 隔天出來的 colonies 幾乎都是 template vector...
明明就只有用一點點做 pcr, 接的時候也只拿 pcr product 的 2ul/50ul,
template 的量應該是少得可憐，
可是 transformation 出來，存活的 colonies 都是 template。
(很不幸我的 template 跟 Topo vector 一樣都是 Kan resistent)
我 labmate 的問題也是一樣，
最後他的解決辦法就是把要 pcr 片段從 template vector 切下來，
再用那個片段去 pcr 才解決這個問題，
可是這樣很麻煩，難道每次用 Topo 都要這樣嗎？
有沒有人遇過同樣的問題，或是知道為什麼會出現這種情形。
為什麼 bacteria 那麼喜歡 template vector,
or 那麼討厭 topo vector？
感謝。
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夢想和現實是有距離的。
一切都將重新開始....
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