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※ 引述《changyaowen (研究生活)》之銘言: : ※ 引述《wadewang (小龜)》之銘言: : : 已經種到快發瘋了 看了之前的討論也沒有頭緒 : : 現在的情況是種10cm dish和75T flask都沒問題 : : 問題都出在3.5cm dish和 24well plate : : seeding的方法是 : : 3.5cm dish是先加入適量medium 然後將細胞液均勻滴在dish上 總體積約1ml : : 然後十字搖法,前後3次左右3次,重複3次 搖晃時間差約為1秒 : : 24well plate則是將細胞稀釋到500ul的體積 然後均勻滴進去 : : 然後一樣十字搖法,前後3次左右3次,重複3次 搖晃時間差約為1秒 : : 下場就是細胞都聚在周圍 : : 中間細胞都很少 : : 到底應該怎麼搖才能均勻阿 : 基本上 我覺得上述的方法 應該不會有不勻的情況 : 如果真的不行的話 我是會在偷懶的時後這樣做 : 就是 假設一個WELL要10CC的量(total medium with cells for culture) : 就直接將妳要細胞數先在tube diulte到10cc : mix 均勻後 直接加入well 如此volume很大又先mix均勻的情況下 : 相信不怎需要搖應該是均勻且可以直接culture : 以上純屬小弟心得 ^^ 如果是 24 well 的話,我會用 1ml tip 直接在 well 中 pipet 均勻後 "靜置" 就放在 larminar flow 裡不要動喔 (我的細胞很耐) 放個 30min~1hr,他就不太會動了,再放入 incubator -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 124.8.83.70
wadewang:感謝大家的建議!! 這幾個方式我會再試試看,應該可以找到 01/26 11:49
wadewang:最好的condition!! 01/26 11:50