[求救]有關IHC的問題

[tincta (佑翔太MAN？ 那改成薰吧.)]

之前我在做IHC，是使用ZYMED的KIT，

其中blocking、一抗、二抗、...以及DAB呈色時，都為了避免浪費，

都是把上述試劑滴在sample上，然後用適當大小paraffin覆蓋其上。



但是目前我新作的石蠟切片非常容易飄起來，

而且因為組織切片本身面積比較大，所以變很容易在這樣的處理中使它凹折或是破碎。




所以我想問：

1.有沒有蓋paraffin以外的方法可以處理？


2.我有閱讀KIT的說明書，其中有提到一抗時可放在潮濕盒

如果我想用潮濕盒的方法，那麼潮濕盒該怎麼做呢？


3.在這同時我Hematoxylin總是染的不夠深，但我之前最長已經染過1min了，

所以也想請問如果是用KIT的大家都染多久呢？

PS.我的組織是養cell line然後注射進老鼠，之後再取下生成的tumor這樣。








麻煩各位先進了。


BY  研一菜鳥   <(_  _)>.......








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因為在那一漫天紛飛的落葉中，
只有一片會在願意理解並同情的持續注視下，在那個瞬間永遠靜止。

                                               ---------駱以軍---------


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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 211.74.180.250
推 freesoul:wet chamber  拿個可以密封的保鮮盒裡面舖層紙巾 用的時
→ freesoul:候加水 總之讓盒子裡溼度越高越好Ab才不會乾掉
推 roddic:請購買Pap pen 一種疏水性的筆 可在section周邊畫圈但很貴
→ roddic:你用潮濕盒是沒用的喔 要減少使用體積只能用畫圈法
→ roddic:一支pap pen 要價2000-2500左右 通常要一次買兩支
→ tincta:請問潮濕盒沒用的意思是還是很容易乾掉嗎？ 那麼有沒有其他
→ tincta:可用的方法？
推 lanth: 一抗的時候也可蓋parafin 可以把Slides 肩並肩排好
→ lanth:一次蓋一大塊這樣省麻煩  再放入wet chamber中
→ lanth:hematoxilin不夠深就再加長時間  如果還是不行 就重新配吧
推 lanth:Sample太大可能不好切 如果可以 就把smaple切成比較小塊
→ lanth:補充一下 一抗使用的體積視sample大小而定
→ lanth:一片直徑1cm的sample 15ul即可
推 lanth:阿 原文沒看清楚 sorry~~
→ tincta:謝謝大家～～
推 runpapa0520:HEMATOXYLINE 染完可以泡氨水 藍化
→ tincta:氨水的濃度和作用時間可以請教一下嗎？