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想請教一下大家 我的直體沒有一些抗-抗生素的基因 如果想要製造stable cell line 可行嗎? 有聽說伴隨另一個抗-抗生素的基因一起trasfection 有可能可以篩選到? (Tet-On system) 有人有這樣的經驗嗎? 謝謝各位. -- 專業. 清新. 新知. [ 了解疾病成因, 了解您服用的藥物 ] ● PTT 生物醫學 ● ● PTT 藥學. 藥物 討論板● 全部都在 國家研究院 > 科學學術 > 生醫研究院 中! >>>>>>>> <<<<<<<<<>>>> PTT pathology PTT pharmacy <<<<<<<<<>>>>>>>> << -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 133.11.70.111
blence:是可以co-transfect如pNeo這種plasmid以>3:1的比例或許可以 06/06 15:16
sunorange:不過 我很好奇 沒有篩選 直接看結果嗎 這樣要有好運氣 06/06 15:17
blence:挑到,不過我覺得效率不佳,染IF發現mix clone只有1/100不到 06/06 15:18
blence:的細胞是有表現的(只是你這要怎麼用Tet-On調控表現?) 06/06 15:20
HIbaby:喔, 謝謝blence ^^ 我不是要做tet-on 只是這種方法從tet-on 06/06 16:28
HIbaby:的建構過程中(別人在做)聽到的. 所以想問一下可行與否 ^_^ 06/06 16:28
HIbaby:想建構的是luc的stable, 還是直接找別種vector比較快 ^^ 06/06 16:30
viorf:可以把細胞稀釋 種在96well中 一格一顆 這樣種個十盤以上 06/06 22:37
viorf:最後從長出來的那幾個去選哪個是你要的 06/06 22:38
viorf:一整個苦功 06/06 22:38
blence:luc似乎很少人挑stable,而且挑到還不好方便測是single,不知 06/06 22:54
blence:有沒ab可用w看,不過篩選的部分還是重新剪marker來接最快了 06/06 22:58
HIbaby:謝謝大家的幫忙 ,感謝 ^^ 06/09 11:05