推 lstlst:謝謝,我跟老師討論看看 07/06 00:49
※ 引述《lstlst (lstlst)》之銘言：
: 話說我有一個A蛋白質
: 人家給我家老師的時候,已經BINDING上紅色的CHERRY PROTEIN
: 當我接手這個PROJECT時
: 我把這個A-CHERRY CONSTRUCT TRANSFECT到細胞中表現蛋白質
: 之後跑膠,TRANSFER到膜上
: 用ANTI-A ANTIBODY 去STAIN
: 結果結果除了A-CHERRY CONSTRUCT 以外
: 底下又多跑出來兩條很明顯很深的BANDS
: 猜想可能是A PROTEIN SEQUENCE上其他的ATG干擾
: 所以我又突變了可能的4個地方的ATG..
: 但是用ANTI-A ANTIBODY OR ANTI-CHERRY ANTIBODY最後跑出來的結果
: 那兩條深深的BAND還是陰魂不散...
: 我也問老師該如何是好,我們老師也不知道那兩條BANDS該如何處理@@
: 因為這樣就可能影響顯微鏡下螢光SIGNAL不純,
: 請問有人可以幫幫我嗎??
: 連要找資料都不知道要怎樣打KEY WORDS @@
會不會是degradation form...??
要確認這個就。。。
不過要先用你們的antibody做IP...
跑完1D-SDS
->Comassive blue stain or SYBRO Ruby stain (別用silver stain)
->pick plot (沒錢就自己拿tip插。。有錢就丟給學校或其他地方挖)
->1D gel digestion (同上)
->丟給中研院打MASS (一點才幾百塊 你兩點加起來不會破千)
看這兩個band到底是何方神聖後就比較好解決。。。
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EVA-RETAKE══════════╬SPHRYU ASUKA LANGLEY ◣ thePainter
Wenn "Liebe" heißt,dieses Versprechen bis zum Tode ▎◥ ◥ ◣
nicht zu brechen...dann verspreche ich: ◣ ▍ ▁▃▄▅▄▃◥
dich immer zu lieben,und keinen Mann außer dir, ◥◥ ▌ ▇▌ ◥▆▅◢◥
solange ich lebe.Alles an mir...von Kopf bis Fuß, ◥▋ ▋"▅ ▁
sogar jedes Haar auf meinem Kopf gehört dir. ◥ ‵▆▆▇
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