事情是這樣的。
在下前一陣子將培養的細胞株，
以皮下注射的方式，
注射到裸鼠的皮下前後腿腳窩處（腹側面）。
在注射完一週時，
基本上鼠隻（N＝6）都還存活，
但我有發現鼠隻的眼睛以及腳指有不正常的腫大。
然後也不是很愛動。
但是再過一週，就只有2隻為活體。
老鼠肢體末端也呈現黑色壞死。
因為行政上的緣故，
所以我是在A實驗室培養細胞，
回溶於PBS（高溫滅菌但無過filter）中，
在騎車到實驗室B的動物房注射。
我在想我的裸鼠會大去，
是不是因為細胞株在運送過程中污染？
還是說因為我是第一次注射活體，
在沒有人指導前處理的情形下，
在操作上產生污染？
（因為我有使用pipette，我後來有聽說，
事實上pipette是最容易污染的，
寧可使用塑膠用過即丟的auto-pipette比較保險。）
我後來也回想說，是不是我自己滅的PBS會有問題。
（那也是我自己配的，用實驗室一般用藥配置）
我在想應該勢必要重新再來，
所以不曉得有沒有先進可以提醒我一下，哪些步驟應該要非常小心，
才不會又使裸鼠死亡？
另我想下次直接去藥局買醫療用的生理食鹽水來打散細胞，
以防止自己因為自己滅的PBS出問題而使裸鼠感染。
在此我想我要簡述一下我的實驗步驟：
將細胞株由培養的T25上以trp打下來，離心後再打散於medium中，
之後進行細胞計數，並取適量細胞液離心，取得十的七次方細胞數/每管。
此時去除上層medium，加入高溫滅菌過的PBS打散細胞，使細胞懸浮。
將裝在eppendroff中以預備好的細胞懸浮注射液在flow中，置入夾鍊袋中，
放在口袋中保持體溫，（騎車）至動物房。
以醫療用注射筒，皮下注射於裸鼠前後腿窩側腹處。
我目前想出的改進點是，不再使用pipette，
而使用用過即丟塑膠製auto-pipette，
以及在打散的步驟中，
使用醫療用針筒打散細胞株，
並且我想用藥局賣的醫療用生理食鹽水取代原本自己滅的PBS
（但不知此點是否可行？）
所以還請各位版友多方指正，
真的很需要各位的幫忙。
By seminar接近爆炸的碩一升碩二但卻是實驗室最大的忐忑研究生
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因為在那一漫天紛飛的落葉中，
只有一片會在願意理解並同情的持續注視下，在那個瞬間永遠靜止。
---------駱以軍---------
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