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※ 引述《mzac1b (Goodday)》之銘言: : 如抬頭 : 想請問 : transfection 載體到細胞 : 可以在細胞表現幾代? 多久(幾天?)? : 感謝 比如說最近很熱門的iPS (induced pluripotent stem cells) 就是強迫成體, 已分化細胞表現 四個轉錄因子以誘導該細胞變成多能性幹細胞 大多數文章使用的方法都是用retrovirus 感染細胞的方式來強迫表現四個因子 我想問的是: 為什麼不用過度表現的方式? 過度表現不是比較方便嗎? 還是有特殊的原因所以不能用過度表現的方式? 感謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.109.55.238
tsubasawolfy:那你要先開啟它門被關閉的promoter吧。。 07/15 22:55
tsubasawolfy:還要找出為何會被關閉 以及那些調控她們表現的機制 07/15 22:55
tsubasawolfy:一個個去調整她們的控制機制不如直接用外來基因表現 07/15 22:56
blence:樓上應該誤解問題and原po對過表見解太侷限,retro也是其一阿 07/15 23:35
tsubasawolfy:我推完文後才發現原PO是認為retro是推動endo - -a 07/15 23:48
tsubasawolfy:不過它們應該都是用retro直接OE才對吧? 07/15 23:49
blence:但我推測原po認為retro表現為infect不算OE,對透過lipo等與 07/16 00:19
blence:plasmid的方式transfect才是,可是已分化細胞也是很挑剔的 07/16 00:23
hek:Retrovirus可以嵌入genome,infection rate很高,你如果同時要 07/16 02:41
hek:時要表現四種protein,又要傳幾代下去 沒有什麼別的方法好選 07/16 02:43
freesoul:硬是要用transfection作4個gene的cell line也不是不行啦 07/16 03:11
freesoul:只是要做到地老天荒而已 XD 07/16 03:11
turtle24:做到最後到底是弄出幹細胞還是癌細胞還是一個問題.. 07/16 11:15