→ bider:我已經有用protienA/G mix去做preclean control 用mouse 07/26 07:10
→ bider:IgG 還有一個postive control 07/26 07:12
→ wangba:preclean除了beads之外還可以加入preimmune ab 07/26 07:13
推 bider:我了解了 謝謝^^ 07/26 07:17
※ 引述《bider (買沉木)》之銘言：
: 小弟這幾天做IP
: 用monoclonal anti-mouse的1抗
: polyclonal anti-goat的2抗
: 結果western出來結果很多雜band
: 想請問有沒有前輩有類似經驗的可以解決@@
: 按理來說
: 不同的Fc應該不會有問題才對
: 是因為polyclonal造成的嗎?
有一個方法可以試試看
先用pre-immune的serium把ㄧ些nonspecific的protein去掉
例如你的例子就是拿沒有打過protein的老鼠的serium
加入beads之後離心完的上清液再加入你的monoclonal 1st antibody
如此就可以去除雜band
不過control要做好 (可以用另一個monoclonal ab)
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