作者bolly (bolly)
看板Biotech
標題[討論] 關於ligation buffer
時間Tue Aug 12 17:40:17 2008
小弟在作ligation實驗時 使用過兩倍跟十倍的ligation buffer
兩倍buffer是pGEM-T附的 十倍buffer是P牌的ligase附的
通常我都會把新來的十倍buffer分裝成2ul一管方便使用
分裝全程置於冰上
兩倍buffer分裝成5ul一管 相同分裝方式
但在作ligation時發現效力差很多 就算是4度over night也差不了多少
想請問大家是用兩倍的還是十倍的buffer 市面上有在賣兩倍buffer嗎?
還是兩倍buffer都是配合商品在賣的
或是說使用十倍buffer都會再另外加一些ATP
如果是外加ATP 那量會用多少?
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◆ From: 140.120.202.50
推 elgase:2X 和10X應該都要work by兩者都用過的路人. 08/12 22:32
推 MrCAKE:用pGemT system時 10X buffer的效率本來就不如2X buffer 08/13 01:38
→ MrCAKE:以前pGemT會附10X Buffer 但現在都只附2X Buffer 08/13 01:39
→ MrCAKE:Promega原廠也是建議使用2X Buffer 10X要買ligase才會附 08/13 01:41
→ bolly:我不只是pGEM-T 接其他的DNA也都還是2X buffer效力好 08/13 09:46