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※ 引述《REIDO (醫工所昏迷中)》之銘言: : ※ 引述《kakaman (日子過的真快阿)》之銘言: : : 接著就像western一樣了 : : 我load的蛋白是total protein : : 我知道除非抗體很好 不然用這方法實在不怎麼恰當 : 我想請教一下,為什麼抗體要很好才有辦法呢? : 我之前也有想過,假設只測一個protein。 : 之前跑過WESTERN確認抗體的專一性,目標分子量也正確,而且PVDF的capacity也夠, : 那為什麼不一開始就直接把sample加到PVDF或NC上面,然後從blocking開始? : 照上面的說法,點狀轉漬應該有缺陷,請問是什麼呢? 因為現在作WB,除了染想要染的蛋白, 通常還要染其他的東西, 像是loading control用的actin or GADPH。 這個時候就是不行的。 如果你的抗體不好,會認超過一個蛋白(這種事情常發生), 一般的PAGE你可以用分子量分開, DOT BLOT就不行了。 -- 過去的來不及追憶 現在的趕不及接受 得到的不懂得珍惜 失去的無法能忘記 這就是生活嗎?! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 125.230.66.18