※ 引述《REIDO (醫工所昏迷中)》之銘言:
: ※ 引述《kakaman (日子過的真快阿)》之銘言:
: : 接著就像western一樣了
: : 我load的蛋白是total protein
: : 我知道除非抗體很好 不然用這方法實在不怎麼恰當
: 我想請教一下,為什麼抗體要很好才有辦法呢?
: 我之前也有想過,假設只測一個protein。
: 之前跑過WESTERN確認抗體的專一性,目標分子量也正確,而且PVDF的capacity也夠,
: 那為什麼不一開始就直接把sample加到PVDF或NC上面,然後從blocking開始?
: 照上面的說法,點狀轉漬應該有缺陷,請問是什麼呢?
因為現在作WB,除了染想要染的蛋白,
通常還要染其他的東西,
像是loading control用的actin or GADPH。
這個時候就是不行的。
如果你的抗體不好,會認超過一個蛋白(這種事情常發生),
一般的PAGE你可以用分子量分開,
DOT BLOT就不行了。
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過去的來不及追憶 現在的趕不及接受
得到的不懂得珍惜 失去的無法能忘記
這就是生活嗎?!
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◆ From: 125.230.66.18