作者borhen (希望夢想成真)
看板Biotech
標題[求救] 有關於SDS-PAGE transfer 的問題
時間Tue Sep 23 19:54:50 2008
有一個問題想向大家請教一下
我們實驗室是利用半乾式轉置槽做protein 轉置到membrane
發現到一個很怪的現像
蛋白質sample為細胞total protein 所以理論上大到小都有
1. 我們把轉置完的sds-page 拿去染色
發現到大分子量的蛋白質 大部分留在membrane上
但小分子量的protein都是乾乾淨淨的
甚至放在最下層的3M paper 有發現protein marker的存在
請問各位專家 實驗到底發生什麼樣的事情~@@
請大家給點建議~~謝謝
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◆ From: 140.113.173.43
推 aceliang:轉漬? 09/23 20:07
推 aborwang:protein大小的差異,如果目標蛋白分子量大一點(>100kD) 09/23 20:12
→ aborwang:我會延長transfer時間10%~20% 09/23 20:13
推 tsubasawolfy:transfer太久小分子亮的protein會跑過membrane.. 09/23 20:42
→ tsubasawolfy:不過還是要看你membrane材質(孔徑) 09/23 20:42
→ tsubasawolfy: 量- - 09/23 20:42