作者fish1234 ()
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標題[求救] p-ERK抑制
時間Wed Oct 8 00:19:16 2008
請問用MEK inhibitor U0126處理細胞抑制p-erk表現
處理前需要做serum starvation嗎?
如果需要的話...serum starvation的時間要多長
我用的細胞是3T3-L1...U0126的濃度10,20,40uM
先做30分鐘的前處理...之後再隨著分化液加入細胞
在一小時跟四小時收細胞
抽細胞蛋白利用western blot分析
結果只有在40uM有看到抑制效果...但效果也沒有很好
一般paper在10,20uM就可以看到抑制效果
但是我在10,20uM卻完全沒有抑制效果
找不出問題在哪
希望有做過這方面實驗的人指點一下
感激不盡
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.129.62.201
推 flyeagle1978:starvation能不用就不用 他不算正常condition 10/08 13:08
→ flyeagle1978:U0126很強 你用的濃度也很高 如果真的不行 10/08 13:08
→ flyeagle1978:你換PD98059試試 也許效果會比較好 10/08 13:09