推 willieh:第一，你的樣品有稀釋嗎？若有記得別稀釋太多倍。 10/12 23:46
→ willieh:第二，試著將std cuv往後拉，若在37,38還有線性，就OK！ 10/12 23:47
→ sinlu:有稀釋 可是我還是把量設定在ABI跟我講的範圍內 10/13 00:23
→ sinlu:因為 他們跟我說 template量太多 有時候反而會影響結果 10/13 00:24
→ sinlu:所以 我就沒有改濃度 10/13 00:24
→ sinlu:嗯嗯 我目前也是將standard curve往後啦 盡量測多點 10/13 00:25
→ sinlu:所以 standard curve最多也只能測到Ct 37-38左右嗎 10/13 00:26
→ sinlu:謝謝^^ 10/13 00:27
推 huangsw:有用melting curve看過嗎 38 39有的時候是非特異性 要小心 10/13 00:36
推 willieh:不過你目前是template不足，增加template量應該沒問題 10/13 00:59
→ willieh:若是擔心n-spc binding，檢查Mt就會知道了(primer決定...) 10/13 01:02
→ willieh:我也試過加倍primer(0.5uM→1uM)，有時會有幫助..抱歉縮寫 10/13 01:05
→ sinlu:我做的是TAGMAN 抱歉 忘了說 10/13 01:32
推 willieh:啊...那抱歉了，我的是SYBR G的經驗.... 10/13 01:42
→ sinlu:沒關係@@ 還是謝謝你 10/13 02:12
推 candy315:通常Ct值要控制在15~30內，會被認為數據比較可信喔 10/14 22:18
→ candy315:當然如果你CT38也在standard curve的線性上，應該也OK啦 10/14 22:19