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最近跑了幾次PCR以及用Restriction Enzyme切plasmid,跑膠時都可看到清淅的band。 不過經過Gel Extration kit extract後去測濃度卻發現ng/uL 都呈現負值,請問這是 什麼問題呢? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.197.50
sGoat:Gel Extration失敗,DNA留在膜上,把抽出來的再跑個膠看看 10/14 22:00
dankai:酒精沒移除乾淨! 10/14 22:07
davideason:慢速過幾次管柱~最後高速甩掉~純水看準點至膜上~放久點 10/14 22:07
davideason:在把 DNA離下來 10/14 22:07
jsi:我也曾遇過這問題 在排除樓上幾位所述可能的原因之後 我選擇改 10/14 22:13
jsi:用不同的Gel Extration kit竟解決了問題 或許您可參考看看 10/14 22:14
owl628:請問樓上失敗根成功的kit分別為啥呢?純粹好奇一下,謝謝~ 10/14 23:37
jsi:失敗的是一組放了很久才開封使用的Qiagene 後來使用的是Axygen 10/14 23:57
jsi:但同一組Axygen也是有人回收率很低 不知是否跟DNA片段特性有關 10/14 23:59
jsi:Qiagene->Qiagen btw,原po的kit該加酒精的bfr不知是否確定有加 10/15 00:06
jsi:以前學弟mini的kit 忘了加酒精 怎麼抽都抽不到DNA @@~ 10/15 00:08
aceliang:忘了加酒精應該沒用幾次就沒了吧= =a 10/15 12:59
jademan:purify後的產物有沒有再跑一次膠看看有沒有band? 10/15 16:51
sneak: 失敗的是一組放了很久才 https://noxiv.com 11/11 01:03
sneak: 酒精沒移除乾淨! https://muxiv.com 01/03 16:46