推 htjsu:有一種很小的機率是 你挑colony時沾到了沒進去的plasmid 12/08 14:30
實驗流程大略如下：
ligation以及圖菌後
隔天長出colony
挑單一colony做cloning PCR
檢測是否目標基因有接進vector中
而我遇到的情況是cloning PCR檢測有看到目標基因被放大
而我將該菌珠培養O/N後 隔天抽plasmid
再做enzyme digestion 結果卻切不出那段基因出來
而且plasmid的位子好像在空的vector位子
送定序出來的結果也很詭異
ps我利用vector上的CMV30為primer 定序結果不到沒有我塞進去的gene
序列也跟vector不同
請問有人遇到跟我類似的狀況嗎？？
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