推 chiehgriffin:protein濃度提高, 產生沉澱了 提高[NaCl] 12/31 17:44
推 liuse:稀釋濃度 01/01 13:39
推 littleable:加點detergent看看有沒有效,Triton X-100 01/03 00:42
使用Ni2+ column純化了數批蛋白質 表現系統是BL21以及BLR
elute->濃縮->通G25或透析換成PBS buffer->再濃縮->產物
產物冰存-70之後再退冰會大量雪花般片狀沉澱 且難以回溶
操作同系統的約有四五人 每個人做的都會發生退冰沉澱的情形
resin中間有換過一次牌子 兩個牌子的純化產物都有退冰沉澱情形
請問有沒有方法可以避免上述的沉澱
之後產物還需要二次純化以及通S200分離雜band 所以盡量以不影響後續處理優先
初步的想法是從存放的buffer-PBS下手 提高鹽類濃度或是添加一些物質
感謝解答及提供任何意見
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