你的設計看起來沒有問題, 而且你都說確定protein有表現出來了.
倒是你提到的inclusion body的問題, 你沒有太多敍述.
你是用denature的方式去純化呢?或者不管inclusion body 只收native的蛋白去純化.
如果你只收native form protein 化去純化, 也許量太少.
可能需要考慮denature的純化方式.
※ 引述《bbiioo (梅子)》之銘言:
: 目前已把目標基因(1.5kb)接到pET29載體上
: 也已經表現出來 形成 inclusing body
: 目前想說先把蛋白純化出來 打小白鼠作抗體
: 蛋白有確定有表現
: 但就是純化不出來 我用的是 talon resin 進行純化
: 基因架接的方式..有點難敘述 用圖檔呈現囉
: http://photo.xuite.net/bio.f21/3108685
: 我都有把我目標基因的stop codon給去掉
: 不知道這樣的設計有哪邊可能出問題?
: 麻煩大家幫幫忙了
: 謝謝
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