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※ 引述《abbyyam (ㄟ逼)》之銘言: : 最近做western 簡直是撞鬼了 : 怎麼做怎麼出問題 : 不過這次主要來問一下protein 的問題 : 就是為什麼我的protein + dye 然後弄下去煮以後 : 有些sample會出現一塊一塊 (或是說一坨一坨) 的...雜質還是沉澱物 : 害我load膠的時候卡住 : 而且我也很擔心這樣我蛋白濃度會不會因此改變 : 導致先前算好要load的量不對 : 這到底是為甚麼呢? 出現這種東西有關係嗎? 要怎麼解決呢? : PS 我在抽protein的時候都有加proteinase inhibitor 我建議你把SAMPLE拿去離心、這很明顯是抽protein的過程沒分乾淨 通常sonication或研磨後的SAMPLE都要再離心、取上清液就好 離心是抽protein的關鍵技巧、速度不對或buffer用錯(包括SDS的量)都會影響 離心後只取融在液體裡的sample -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.109.40.45