推 tsubasawolfy:染色液?一抗?兩片? 03/07 12:01
→ willie0208:我是做兩片膠 然後去用com blue去看我的蛋白質狀態 03/07 12:23
→ willie0208:然後一抗是我之前做過的DATA 呈色完怪怪的 03/07 12:24
推 tsubasawolfy:buffer條件是啥? 03/07 13:43
推 phyton:把詳細步驟寫出來吧，真的看不太懂，而且marker看起來很好? 03/07 17:04
嗯 我也是有在懷疑sample的問題
我昨天又做了一片 但是我換了acrylamide
然後在用染色液染 發現我的sample有跑下來
只是為什麼我的marker一樣72跟95的band還是分不開呢??
且我的一抗是beta-actine 照理說應該要在43的位置不是嗎??
為什麼呈色完還是一直在72-95之間呢??
一直沒辦法理解 還是謝謝各位大大的幫忙
有可以解決問題的請跟我說一下
謝謝你們 ^^
※ 引述《phyton (飛騰)》之銘言：
: 看起來像是 sample 裡有未溶解的雜質
: 有時候 DNA 也會造成這個歪歪的樣子
: 或許可以試看看 loading 前 (其中一種或多種混合)
: 1)離心一下取上液
: 2)超音波打一打
: 3)過針頭很多次
: 不過老實說，如果不需要精確定量
: 也沒什麼關係啦
: ※ 引述《willie0208 (我不要現在就出征....)》之銘言：
: : 又來向各位大大求救了
: : 最近做的western blot
: : 呈色後跑出來的膜看起來都好奇怪喔
: : http://www.wretch.cc/album/album.php?id=willie0208&book=6
: : 有沒有大大可以解釋一下有什麼特別的原因嗎?? (1抗 beta-actin)
: : Buffer都有重新配過了
: : 組織的Sample也都重新均質過了
: : 1抗 2抗都重新配過了
: : 現在想不出來到底問題在那裡
: : 有大大可以幫忙嗎????
: : 謝謝你們 ^^
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