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各位板友及前輩好 最近小弟要做細胞的IHC 想要用甲醇,甲醛 或是福馬林固定 請問這三個固定的特性為何 因為抗體是要進細胞核的 以前做tissue染細胞核的protein 都是福馬林固定用citric acid煮沸 請問細胞也需要citric acid煮沸嗎? 感恩 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.129.77.148
nzj:福馬林不就是甲醛嗎 04/10 13:05
allisa:細胞不用吧 記得需要retrieval是由於蠟塊包埋的過程中 04/10 14:29
allisa:會使得抗體辨認位置有點變性所以才要做retrieval 04/10 14:30
iiidns:染細胞核需要 只是差別在加熱時間長短 04/10 18:37
humwang:若是要染核蛋白的話,建議用冰甲醇固定30秒到一分鐘 04/10 20:47
humwang:因為用PFA固定後還要用triton X-100在膜上打洞 04/10 20:48
humwang:這種打洞的效果在細胞膜上不錯,但是在核膜上不佳 04/10 20:49
humwang:短時間的冰甲醇固定是能把細胞膜跟核膜都部分溶解 04/10 20:51
humwang:所以之後要染核蛋白時,有利於抗體進入核中 04/10 20:51
apa9394:感謝各位先進的建議 小弟會試試看的 感恩<(_ _)> 04/12 16:03
sneak: 感謝各位先進的建議 小 https://muxiv.com 11/11 01:24
sneak: 因為用PFA固定後還要 https://noxiv.com 01/03 16:53