作者isdorothy (我的肚子流出褲子)
看板Biotech
標題[求救] 冷凍切片的IHC
時間Fri Apr 17 21:45:36 2009
片子先用PBS WASH
之後4%PFA固定10 min
PBS WASH
h202 methanol 10min
PBS WASH
1抗 4度 O/n
PBS WASH
2抗一小時
DAB呈色
我的蛋白是在細胞核
為什麼都染不上哩
她也會表現在細胞核 細胞核有看到
而且別人PAPER的呈色都是鮮紅色
我做的都是有點粉紅 而且cunterstain後 核的染色更不明顯了
請問大家我的片子處理過程是否有問題呢 是用OCT包埋的冷凍切片
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◆ From: 118.171.126.172
推 allisa:要加triton打洞嗎? 不確定 請其他高手來建議~~~ 04/18 01:46
→ allisa:DAB呈色我看都是紅棕色耶@@ 或咖啡色 是鮮紅色嗎@@? 04/18 01:47
→ allisa:而且如果你染的蛋白在核 cunterstain就不要染核了吧? 04/18 01:48
→ allisa:有其他的cunterstain可以用呀~~ 04/18 01:49