[討論] 有人家裡的PC3確認過沒有p53的嘛?

[tsubasawolfy (悠久の翼)]

這問題是昨天發現的

照理說PC3他本身的p53已經framshift掉提早終止 (1 allele)

但是我們換了2隻antibody(cell signaling, calbiochem)

依然可以在64-50區間出現訊號強烈的p53 (顯影時間1sec, 細胞是在無stress之下)

同樣拿來比較的LNCaP在無stress之下的確是沒有訊號 有壓力之下訊號梯度上升


這問題初步懷疑這株細胞根本不是PC3而是DU145
(兩個phosphosite mutation 即使在normal情況下p53的量還是一堆)

因為它的細胞型態跟無AR 缺少PSA都和PC3一樣..

但是我們本身並沒有養任何DU145....放在同一個incubator的也沒有

而用camptothecin處理完後跑cell cycle跟文獻一樣是停在early S

這點又跟DU145一樣...PC3根據以前文獻是停在G2/M 而且IC50出來也差蠻多


打電話去當初買的食工所確認 他們的說法是當初的確是寄送PC3 還有他們的PC3跟DU145

是分開養的

不過這株細胞已經買來快8年了這中間也經手過很多人培養...雖然說老闆覺得是

食工所出錯...不過保險起見還是問問看其他人是不是有同樣的情況0.0?

假如同樣都從食工所買來的但是的確沒有p53訊號的話那....前人就有人要走著瞧了...

老闆初步決定是要送karyotyping檢驗(兩株細胞有染色體上的差異)

ps 高醫的PC3就不用問了 因為幾乎都是我們分出去的...

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修奇︰當我的後宮吧。    伊露莉︰好，我知道。
修奇︰你應該問我為什麼要你當我後宮吧？
伊露莉面帶像是抱歉的表情看我，然後努力裝出好奇的表情，說道︰
"是，修奇。你為何要我當你後宮呢?"
hatako:因為我想和精靈達到協調，阿~可是我不會忘記妳的，傑米妮。

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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) 
◆ From: 219.85.58.23
推 blence:paper都寫PC3是p53 null cells,應該很少人會去看吧,再買一
→ blence:次去送karytyping去賭,要是錯的食工所就要負責,對了話以後
→ blence:lab也應該要一株正確的可以留著備用
→ blence:以前lab要一株ATCC的line,委託食工所代購並寄存,一兩年後竟
→ blence:然養到細胞在網站細胞清單中消失,或許他們不是百分百安全的