推 jodelle:不見得要設計miRNA的sequence來當primer 07/22 23:46
最近準備要作miRNA的實驗
老闆是打算自己clone miRNA的 construct
看了paper之後
他們是clone pre-miRNA insert由PCR得到
paper上使用的PCR primer是根據pre-miRNA的sequence
設計overlapping的primer
forward和reverse的primer分別大概是60~80 mer
我找了幾個paper裡面所clone的miRNA
對了miRBase裡面的sequence之後
只能看出forward和reverse primer大概有overlap十幾二十個mer
(不同的miRNA overlap程度不同)
想請問如果我要設計primer的話
是只要forward和reverse primer有overlap到就可以了嗎?
還是有其他的需要注意?
謝謝^^
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