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其實可以不用這樣啦~~ 可是試著在target RNA兩段加以隻序列的linker就好了阿 ※ 引述《peggy814 ( )》之銘言: : 最近準備要作miRNA的實驗 : 老闆是打算自己clone miRNA的 construct : 看了paper之後 : 他們是clone pre-miRNA insert由PCR得到 : paper上使用的PCR primer是根據pre-miRNA的sequence : 設計overlapping的primer : forward和reverse的primer分別大概是60~80 mer : 我找了幾個paper裡面所clone的miRNA : 對了miRBase裡面的sequence之後 : 只能看出forward和reverse primer大概有overlap十幾二十個mer : (不同的miRNA overlap程度不同) : 想請問如果我要設計primer的話 : 是只要forward和reverse primer有overlap到就可以了嗎? : 還是有其他的需要注意? : 謝謝^^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 114.40.145.243