推 boblu:實作多是用 PCR 08/07 08:28
推 hickory:感謝您！ 非常清楚！ 08/07 08:47
→ schmitt:PCR+1 08/07 17:45
※ 引述《hickory (C'est la vie)》之銘言：
: 請問一下板上有在做老鼠的學長姐們 小弟念到一篇論文，用老鼠來做
: MECP2基因缺失的實驗。這篇文在材料方法中提到
: All of the mice used in these experiments were generated by crossing
: heterozygous female Mecp2 Flox/+ mice that had been backcrossed to
: 129S6/SvEvTac for at least five generations to male mice on either a pure
: FVB/N background or male mice on a pure C57BL/6J background to generate
: isogenic F1 animals. Only male animals were used for all the experiments
: listed with WT littermate males serving as the controls.
: 我自己對這一段的理解是 他用 129S6 ，基因型 XX 的母鼠 和
: FVBN、C57BL/6J 兩種品系的公鼠去交配，變成 XX XY
: (此基因X-Link，X代表某基因被Knokout，X是正常性染色體)
: 生出子代的公鼠有兩種，一種是 XY ，一種 XY
: XY 拿來做實驗；XY當作 wild type control
: 但我的問題是，實驗者怎麼知道這隻老鼠是 XY 還是 XY ？
: 想了很久，不得其解，來版上請學長姐不吝賜教
: 附上原文 http://www.badongo.com/file/15942038
從內文看來，floxed allele仍保留neo cassette
所以 WT 的 X染色體與floxed X染色體之間，長度就有差異(neo cassette約 2 Kb)
因此只要切小鼠的尾巴抽DNA
利用PCR或是Southern blot就可以看出小鼠的 X 染色體是WT 或 floxed allele
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我不想在球場上當一個沒用的人
也許我真得不是很厲害
再練下去也只有這樣子...
可是.......我就是會認真地去練習
賭賭看明天會不會變強一點...
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