作者puec2 (^^y)
看板Biotech
標題Re: [求救] 送大的植體進DH5啊法~
時間Wed Dec 30 20:37:44 2009
※ 引述《juwoo (redeye)》之銘言：
: 受學長姐之命要送個16Kb的plasmid進DH5a
: 但是不論用電的用燙的(heat shock)都沒辦法把他老大請到菌裡...
: 也不知道是不是Ligation的問題= =
: 接的方法是7K+9K一平一鈍的方法黏接
: 請問板上的各位高手有甚麼好的意見
: 謝謝
: (__)
我也遇過這個問題，建議你
1. 減低plate中抗生素濃度。
2. 放在室溫培養。
3. 再不行就換菌株。
我猜猜看，plasmid裡面是病毒嗎？
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 211.76.175.170
推 hchs890843:突然想到~~做這麼龜毛的vector一定要recover 1 hr再塗 12/31 00:46
→ spirithorse:heatshock 42度3分鐘,冰上3分鐘,加SOC(42度) 01/02 20:48
→ spirithorse:再incubator一個半小時到兩個小時 01/02 20:48
推 juwoo:不是病毒@@ 01/05 10:10
→ juwoo:我有incubator2小時了 01/05 10:11
→ juwoo:42度3分鐘菌不會死嗎@@? 01/05 12:37