[求救] 冷凍切片 IHC 貼片問題

[valentine7 (噴噴貓)]

我是沒有人帶的冷凍切片新手

我的方式是切下來之後
(腦 切30um)
在cryostat用水彩筆小心展片之後
以存放於室溫的玻片去沾取腦片
腦片就會貼附在玻片上

練習了幾次之後
已經可以展得很好
但是卻發現新的問題

就是在"貼"的這個動作
腦片與玻片之間出現空隙 也就是產生了像是"氣室"的東西...
尤其是在加了H2O2之後更加明顯
(一開始還不知道是這個問題 只覺得厚薄不一
 貼得好的腦片 加了H2O2不怎麼產生氣泡
 沒貼好的腦片 則是產上一堆氣泡 尤其是腦片與玻片之間尤其明顯 且去不掉...)
導致之後的染色 看片 都很糟糕

請問各位高手有沒有甚麼小TIP
可以教教小妹
謝謝!

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◆ From: 140.112.96.249
→ faycos:我也會這樣耶~~怎麼辦?
推 wintercastle:玻片有沒有經過coating處理?
推 vandia:拉片的角度要練一下..一定不能平行下去貼
→ vandia:要練先沾一邊,然後順勢往上拉,這樣貼出來就會很平整
→ vandia:同理可以用在石蠟片
→ valentine7:有coated的 好 謝謝樓上 我下次再多練幾次!!!
→ valentine7:我發現8um比較不會有這個問題耶 隨便貼都漂亮
→ valentine7:但30um的 真的很難!!!
→ agh0913:冷凍切片不建議H2O2處理 可以用Sodium Azide(NaN3)取代
推 DanteDevil:真的只有多練練了...角度很重要...