作者puec2 (^^y)
看板Biotech
標題Re: [求救] clone不出來
時間Tue Jan 19 22:06:17 2010
不知道你成功沒有?
我覺得enzyme digestion的問題比較大。
我建議你拿回收的PCR片段去做TA-cloning,先把你要的fragment
和兩端的cutting site先clone到TA vector上面,再從做好的clone上面(記得定序)
用BamHI/EcoRI把你要的fragment切下來,
再clone到你要的vector上即可。
順便問一句,你有記得要在兩端的primer上面的cutting site旁邊多加幾個mer嗎?
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 211.76.175.170
推 jck0406:我在跑gradient,不過怪怪的,band都很多... 01/19 22:18
→ jck0406:我們有在cutting site+3個mer 01/19 22:18
→ jck0406:不過我們實驗室沒有TA vector耶~"~ 01/19 22:19